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染色質免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation, ChIP)
來源: | 作者:3 | 發布時間: 1844天前 | 1990 次瀏覽 | 分享到:
染色質免疫共沉淀技術的原理是在活細胞狀態下固定蛋白質-DNA復合物,并將其隨機切斷為一定長度范圍內的染色質小 片段,然后通過免疫學方法沉淀此復合體,特異性地富集目的蛋白結合的DNA片段,通過對目的片斷的純化與檢測,從而獲得蛋 白質與DNA相互作用的信息。


基本原理:

染色質免疫共沉淀技術的原理是在活細胞狀態下固定蛋白質-DNA復合物,并將其隨機切斷為一定長度范圍內的染色質小 片段,然后通過免疫學方法沉淀此復合體,特異性地富集目的蛋白結合的DNA片段,通過對目的片斷的純化與檢測,從而獲得蛋 白質與DNA相互作用的信息。
一般流程:

甲醛處理細胞→收集細胞,超聲破碎→加入目的蛋白的抗體,與靶蛋白-DNA復合物相互結合→加入Protein A,結合抗體-靶蛋白-DNA復合物,共沉淀→對沉淀下來的復合物進行清洗,除去一些非特異性結合→洗脫,得到富集的靶蛋白-DNA復合物→解交聯,純化富集的DNA-片斷→PCR分析



組蛋白的修飾研究;染色質表觀遺傳修飾研究;轉錄調控分析;藥物開發研究;有絲分裂研究;DNA損傷與凋亡分析等。

客戶需提供 :

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