成骨誘導
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發布時間: 1883天前
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成骨誘導,是指來自植床周邊宿主結締組織中的可誘導成骨前體細胞,在誘導因子的作用下可被誘導定向產生骨原細胞、成骨細胞。
工作原理:
成骨誘導,是指來自植床周邊宿主結締組織中的可誘導成骨前體細胞,在誘導因子的作用下可被誘導定向產生骨原細胞、成骨細胞。
操作方法和步驟:
1.原代的MSCs分離后,置于37℃,5%CO2培養箱中培養,每2-3天換液或傳代;
2.建議使用低代次的MSCs(<8代,隨著傳代后代次的增加,多向潛能的能力也逐漸降低)。當細胞融合度達到60-80%時,用0.25%Trypsin-EDTA進行消化進行傳代。
3.收集細胞,按照5×103cells/cm2的細胞密度接種在預先用明膠包被的六孔板中,每孔培養基2 ml,37℃,5%CO2培養。
4.待細胞融合度達到60-70%,開始誘導,小心棄去培養基,并小心沿壁加入37℃預熱的成骨誘導分化培養基;
5.每隔3天更換新鮮預熱過成骨誘導分化培養基;
6.誘導2周后,為盡可能避免成骨細胞卷邊,脫落,每3天全換液更換為每2天半量換液,直至誘導出現大量礦化結節。
成骨檢測方法:
1.ALP活性檢測;
2.茜素紅染色(鈣結節染色)。
客戶提供:
1.成骨前體細胞;2.成骨誘導分化培養基。
*終交付:
實驗原始數據和實驗報告單。
服務案例:
