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染色質(zhì)免疫共沉淀（chromatin immunoprecipitation, ChIP）
來源: | 作者:3 | 發(fā)布時間: 1844天前 | 1991 次瀏覽 | 分享到:
染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物，并將其隨機(jī)切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小 片段，然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段，通過對目的片斷的純化與檢測，從而獲得蛋 白質(zhì)與DNA相互作用的信息。


基本原理：

染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物，并將其隨機(jī)切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小 片段，然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段，通過對目的片斷的純化與檢測，從而獲得蛋 白質(zhì)與DNA相互作用的信息。
一般流程：

甲醛處理細(xì)胞→收集細(xì)胞，超聲破碎→加入目的蛋白的抗體，與靶蛋白-DNA復(fù)合物相互結(jié)合→加入Protein A，結(jié)合抗體-靶蛋白-DNA復(fù)合物，共沉淀→對沉淀下來的復(fù)合物進(jìn)行清洗，除去一些非特異性結(jié)合→洗脫，得到富集的靶蛋白-DNA復(fù)合物→解交聯(lián)，純化富集的DNA-片斷→PCR分析



應(yīng)用

組蛋白的修飾研究；染色質(zhì)表觀遺傳修飾研究；轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析；藥物開發(fā)研究；有絲分裂研究；DNA損傷與凋亡分析等。

客戶需提供 :

細(xì)胞及相關(guān)調(diào)控關(guān)系基因名稱。

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